Tujuan :
Untuk mngetahui kadar Hemoglobin ( Hb ) seseorang dalam g/dl.
Prinsip :
Metode ini berdasarkan pada penetapan Cyanmethhemoglobon yang telah diadaptasi sebagai metode standart. Hemoglobin dari sampel darah lengkap dilepaskan dari eritrosit dan dioksidasi oleh Fericyanida menjadi methemoglobin. Methemoglobin ini selanjutnya diubah oleh Cyanida menjadi Cyanmethemoglobin yang stabil. Absorbansi dari Cyanmethemoglobin ini diukur pada 540 nm dan secara langsung hasilnya sebanding dengan konsentrasi hemoglobin dalam sampel.
Alat dan Bahan :
Peralatan dan pereaksi
Prinsip :
Metode ini berdasarkan pada penetapan Cyanmethhemoglobon yang telah diadaptasi sebagai metode standart. Hemoglobin dari sampel darah lengkap dilepaskan dari eritrosit dan dioksidasi oleh Fericyanida menjadi methemoglobin. Methemoglobin ini selanjutnya diubah oleh Cyanida menjadi Cyanmethemoglobin yang stabil. Absorbansi dari Cyanmethemoglobin ini diukur pada 540 nm dan secara langsung hasilnya sebanding dengan konsentrasi hemoglobin dalam sampel.
Alat dan Bahan :
Peralatan dan pereaksi
- Mikropipet 20 mikroliter/mmk
atau dapa menggunakan pipet Hb sahli
- Pipet volumetrik 5 ml
- Tabung reaksi ukuran 75 x 10 mm
- Spektofotometer.
- Larutan drabkins.
Larutan
drabkins terdiri dari :
- Kalium ferrosianida 200 mg,
- KCN 50 mg
- Kalium hydrogen fosfat 140 mg
- Detergen 0,5 – 1 ml
- Aquadest/detenized water ad.
1000 ml
Cara Kerja :
Pipet dan masukkan ke dalam tabung
reaksi
|
Blangko
|
Sampel
|
Larutan pereaksi ( Drabkins )
|
5 ml
|
5ml
|
Sampel darah dengan pipet hb sahli
|
-
|
0,02 ml
|
Kemudian
bilas pipet dengan campuran pereaksi dan campur dengan baik. Baca absorbance
sampel terhadap larutan pereaksi setelah 3 menit. Kompleks warna stabil dalam
waktu 2 jam terlindung dari cahaya.
Fotometer :
Panjang
gelombang : 546 nm
Program :
c/f
faktor :
36,8
Harga Normal
:
- Bayi baru lahir
: 16 – 25 g/dl
- Anak-anak
: 12 – 16 g/dl
- Lelaki
: 14 – 18
g/dl
- Perempuan
: 12 – 18 g/dl
- Infants
: 10 - 15 g/dl
- Young
Children : 11 - 14 g/dl
Pembahasan :
Internasional Committe for Standarization in Hematology (ICSH) merekomendasikan metode sianmethemoglobin, sebab selain mudah dilakukan juga mempunyai standar yang stabil dan hampir semua jenis hemoglobin terukur kecuali sulfahemoglobin.
Penetapan kadar Hb metode ini sangatlah dianjurkan, ketelitian pada metode Cyanmethhemoglobin +- 2 %.
Sumber kesalahan dalam metode ini antara lain :
Internasional Committe for Standarization in Hematology (ICSH) merekomendasikan metode sianmethemoglobin, sebab selain mudah dilakukan juga mempunyai standar yang stabil dan hampir semua jenis hemoglobin terukur kecuali sulfahemoglobin.
Penetapan kadar Hb metode ini sangatlah dianjurkan, ketelitian pada metode Cyanmethhemoglobin +- 2 %.
Sumber kesalahan dalam metode ini antara lain :
- Terjadinya jendalan darah
- Leukositosis berat mempengaruhi
pengukuran lebih rendah dari seharusnya
- Tidak tepat memipet pada saat
mengambil darah
- Pemipetan pereaksi yang tidak
akurat
- Fotometer yang kurang baik
0 comments:
Post a Comment